Directrices de laboratorio para la detección de la infección por el virus de la viruela del mono
El Director General de la Organización Mundial de la Salud (OMS) declaró el brote global creciente de viruela del simio una Emergencia de Salud Pública de Preocupación Internacional (PHEIC, por sus siglas en inglés) el pasado 23 de julio de 2022. Según la OMS, hay más de 35,000 casos en 92 países/territorios, y 12 muertes al 17 de agosto. La mayoría de los casos informados (con antecedentes de viaje) viajaron a áreas de Europa y América del Norte.
La viruela del mono es una enfermedad rara causada por la infección con el virus de la viruela del mono (MPXV), un virus de ADN de doble cadena envuelto que pertenece a la misma familia de virus que causan la viruela. Este virus puede transmitirse a través del contacto con fluidos corporales, lesiones en la piel o superficies mucosas internas con síntomas como fiebre, dolor de cabeza y dolores musculares. El período de incubación de la viruela del simio suele ser de 6 a 13 días, pero puede oscilar entre 5 y 21 días (alrededor de tres semanas).
Según la OMS, las mejores muestras de diagnóstico se obtienen directamente de la erupción: piel, líquido o costras, o biopsia cuando sea viable. Otros métodos, como la detección de antígenos y anticuerpos, pueden no ser útiles, ya que no distinguen entre los ortopoxvirus.
Se recomienda un enfoque basado en el riesgo al manipular las muestras de los casos sospechosos, probables o confirmados de viruela símica en el laboratorio. Por lo tanto, los procedimientos para detectar la presencia del MPXV, que se clasifica como un patógeno del grupo de riesgo 3, deben realizarse en un laboratorio de Bioseguridad Nivel 2 utilizando la lista de equipos que se muestra a continuación.
Guía del equipo para la detección del virus de la viruela del mono
Almacenamiento de muestras y reactivos
Se recomienda refrigerar las muestras MPXV entre 2 °C y 8 °C o deben congelarse (-20 °C o menos) dentro de la hora posterior a la recolección. Si el tiempo de transporte supera los siete días, las muestras deben almacenarse a -20 °C o menos. Mientras tanto, se recomienda -70°C para el almacenamiento de muestras a largo plazo (>60 días desde la recogida).
Los refrigeradores, congeladores de laboratorio y congeladores de temperatura ultrabaja de Biobase están equipados con sistemas de refrigeración bien diseñados y materiales de alta calidad adecuados para el almacenamiento de muestras biológicas sensibles a la temperatura que requieren condiciones de almacenamiento críticas.
Manipulación y preparación de muestras
El MPXV puede transmitirse durante la etapa de procesamiento de muestras debido a material contaminado o métodos inadecuados. Como resultado, se deben observar mayores medidas de bioseguridad. Antes de la inactivación de la muestra, las muestras de pacientes con sospecha de MPXV deben prepararse en una cabina de bioseguridad de clase funcional II; sin embargo, esto no es necesario para especímenes debidamente inactivados.
Aparte de la protección que brindan las cabinas de bioseguridad, las cabinas de seguridad biológica Biobase Clase II cumplen con NSF 49 y EN 12469 con características fáciles de usar y están recubiertas con polvo antimicrobiano en todas sus superficies pintadas externas e internas para mejorar la seguridad. Las centrífugas son necesarias para la separación de los componentes líquidos y sólidos de la muestra. Se recomiendan copas de seguridad o rotores sellados si son esenciales para el procedimiento.
Detección y Análisis
Se realizan pruebas de amplificación de ácido nucleico (NAAT) para confirmar la infección por MPXV. Para detectar secuencias únicas de ADN viral, se utiliza la PCR en tiempo real o la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) convencional. Hay dos pasos involucrados en la detección de virus. La primera PCR detecta ortopoxvirus pero no identifica la especie, mientras que la segunda PCR (o secuenciación) detecta específicamente MPXV.
Un termociclador de PCR en tiempo real proporciona una amplificación eficiente de los ácidos nucleicos para el análisis de virus. Biobase ofrece los nuevos termocicladores de PCR Swift™ con una computadora integrada para un funcionamiento independiente desde la entrada, el control y el análisis del programa de PCR.